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medio Ploskireva (Bacto-agar F): descrizione. microbiologia medica

medio Ploskireva (in seguito denominato ancora Bacto agar F) è un mezzo nutriente per la coltivazione di certi microrganismi, principalmente Shigella e Salmonella. Come fonte per suo uso di materiali infetti: l'urina, la bile, le feci.

storia

Nikolay Ivanovich Ploskirev – microbiologo Sovietica e medico Onorato. E 'nato nel 1869 e morto nel 1948, dopo aver lavorato la maggior parte della sua vita nella sua città natale – Tomsk.

Nel 1888, lui, il futuro scienziato, senza completare il sesto grado della scuola, si arruolò nell'esercito. fu in grado di completare la formazione solo nel 1892, poi sostenuto gli esami per l'ammissione al imperiale Tomsk University, ha studiato presso la Facoltà di Medicina. Nel 1898 ha ricevuto il titolo di dottore.

Ploskirev partecipato a guerra russo-giapponese, e dopo ha funzionato in ospedale Tomsk. Nel 1910 è stato nominato per il posto di capo della Tomsk ospedale dermatologico e veneree, e per trenta anni è stata la sua testa permanente. Lo stesso scienziato è stato uno dei fondatori della STI clinica a Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev ha scritto una serie di opere dedicate alla lotta contro le malattie veneree.

struttura

Mercoledì Ploskireva – materiale per la coltivazione di batteri intestinali e, di conseguenza, deve contenere diversi tipi di sostanze nutritive. Viene prodotto in forma secca.

Piuttosto una gran parte del suo peso totale è pancreatica spratto idrolizzato (10,4 g / l). Leggermente meno rappresentato sodico bibasico hydrocitrate (8,5 g / l). Inoltre v'è un brodo di coltura e lo zucchero del latte (8,62 e 7,3 g / l) a secco.

Il secondo titolo Ploskireva medio – J. Bacto-agar nella composizione è presente in una quantità di agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo contenuto di sodio anidro pari a 5,1 g / l. V'è la presenza di sodio fosfato dibasico anidro – 2,1 g / l, sali di sodio di acido colico circa 3,46 g / l e soda – 2,4 g

Meno di un grammo essi contenute indicatori – rosso neutro (0,05) ed antisettico (0,0002). Il contenuto di iodio – 0,13.

applicazione

Lo studio dei processi biochimici di batteri svolge un ruolo molto importante nella diagnosi di malattie che causano microrganismi anaerobi. Specie in questa famiglia – centinaia. Sono quasi identici in beni culturali morfologia e, e il modo più affidabile per distinguerli gli uni dagli altri – è lo studio della biochimica.

Lo studio inizia con l'inoculazione di materiale patologico nel mezzo di coltura. Si patologico differenziale per batteri coliformi e una parte di esso, oltre alla normale agar, include luce e lattosio. capacità di elaborazione di lattosio – un segno importante di differenziazione degli enterobatteri. Se questo viene scoperto, il pH si sposta verso l'acidità e l'indicatore è attivato, che trasforma la colonia.

Altri paesi possono utilizzare altri mezzi di nutrienti, ma il loro meccanismo di azione corrisponde al tre più comuni in Russia – questo ambiente Endo e Levine Ploskireva Mercoledì.

Descrizione del metodo

Dall'estero mezzo Ploskireva analogico è un cosiddetto MacConkey Agar. In soluzione trasparente forma finita è di colore rosa giallo chiaro. Colonie capaci di elaborare il lattosio, tra Ploskireva danno rosso colore (mirtillo). Se i batteri non possono elaborare, o colonia è incolore o ha un colore debole.

Dato che la composizione del mezzo comprende sostanze inibitori Ploskireva (verde brillante, sali biliari, iodio), si inibisce quasi completamente la crescita della flora gram-positivi, come nel primo eshehiry giorno ritarda significativamente la crescita, così come altri consueto microflora concomitante.

seconda tappa

Ulteriore interesse è la selezione della colonia, ed è seminato su un supporto di memorizzazione primaria e differenziazione. Ambiente in cui ci si seeding dovrebbe contenere più substrati. coltura batterica dovrebbe rilevare l'attività enzimatica rispetto ad essi, allo stesso mezzo posta nei tubi in modo che ci sono due siti:

  • uno in cui l'agar inclinato;
  • con una colonna.

L'interesse dei ricercatori nella colonia popolata porzione smussata ictus denso e in una colonna – una puntura. In questa fase, il mezzo utilizzato Russell, Kligler o Olkenitskogo. Come diagnosi differenziale utilizzato e Ploskireva Mercoledì.

organismi patogeni e microbiologia

Agar Ploskireva è un fattore importante nella determinazione delle infezioni causate da Enterobacteriaceae. Così, per esempio, viene coltivato e colonie di microrganismi che causano dissenteria bacillare differenziato. Questo anaerobici microrganismi appartenenti al genere schigella.

Come tutti coloro che sono parte di una famiglia di batteri intestinali, Shigella hanno la forma di barre, delle dimensioni di due micrometri. Essi non costituiscono capsule e spore hanno flagelli – permette loro di essere distinti da Salmonella, che, a loro volta, sono mobili. Crescono bene sulla maggior parte dei mezzi semplici, ad una temperatura leggermente sopra la temperatura ambiente (35-37 ° C) e 7,4 pH. Per la natura della crescita, colonie non differiscono da Salmonella.

Come discusso sopra, i microrganismi possono essere differenze morfologiche sostanzialmente, tuttavia, varia notevolmente nei processi biochimici della vita. Così, tranne Shigella Nyukestl, senza la formazione di gas acido si verifica durante la fermentazione di carboidrati. Con l'eccezione di Shigella sonnei, non possono fermentare il lattosio, ma viene digerito glucosio. Proprio per le loro caratteristiche principali, li si può portare quello che possono per ridurre niraty in nitriti. Le loro colonie sono stati digeriti con urea, così come nel terreno di coltura non è liquefazione di gelatina.

Raccolta e preparazione del seme

Per rilevare agenti di dissenteria, sono richiesti test microbiologici ambienti infestati, cioè le feci paziente. Al ricevimento del materiale, è necessario il più rapidamente possibile per fare la semina. Se ciò non fosse possibile, la fonte deve essere collocato in un conservante – miscela tampone fosfato o glicerolo. A 4 ° C, possono essere conservati per più di un giorno. Raccogliere il materiale deve essere effettuata per mezzo di un tubo di vetro rettale che viene inserito nel retto.

Per gli studi di un materiale scelto pezzi mucopurulento essere lavati in due o tre provette soluzione isotonica di cloruro di sodio.

Applicazione di batteri patogeni nell'ambiente Ploskireva fatto spatola di vetro. È necessario strofinare su una piccola porzione del suo agar, poi strappare la spatola sull'ambiente, e il materiale residuo viene strofinato sulla superficie seminata. Se la semina viene effettuata in un paio di tazze, poi a ciascuno di loro hanno bisogno di piantare un nuovo lotto.

Se pezzi muco-purulente là nel prendere su un'analisi dedicato, ciò non significa che non vi sia presenza di agenti patogeni. In tal caso è necessario per emulsionare feci in 10 ml di cloruro di sodio (concentrazione 0,85%) e poi seminare una o due gocce su un supporto Ploskireva. sedia non emulsionato può essere seminato in brodo selenitovy. Egli ha anche usato, se, invece delle feci sono vomito o lavaggi.

diagnosi microbiologica

Nella prima fase di studi microbiologici effettuata la semina dei batteri patogeni in due tazze, poi a guardare come crescere Shigella. Mercoledì scorso Ploskireva ha prodotto un raccolto, e la seconda – sull'ambiente o Endo Levin.

A causa del fatto che c'erano ceppi di Shigella resistenti agli antibiotici, al mezzo è stato integrato con cloramfenicolo. Poi si verifica entro pochi giorni di incubazione in un incubatore a 37 ° C.

Il secondo giorno per esplorare le colonie cresciute. Coloro che non sono sul terreno diagnostico differenziale cresciuto incolore, è necessario estirpare medio o corto di Russell "fila eterogeneo." Ulteriori ricerche è stato condotto da l'algoritmo delle colture primarie su di loro. Colonie di Shigella su Mercoledì Ploskireva crescono in forma di colonne trasparenti, incolori e piccoli. Essi sono di due tipi:

  • appiattito con bordi frastagliati;
  • arrotondata, convessa, con una lucentezza tipica bagnato.

Tre o quattro colonie devono essere mikroskopirovat ed esaminati per la mobilità. Se quest'ultimo non si presenta, ci siamo trasferiti il Mercoledì Olkenitskogo per isolare una coltura pura. In assenza di colonie caratteristiche Shigella o se nessuna crescita si osserva affatto, è necessario endo agar o Ploskireva prodotti semina di brodo selenitovogo. Se le colonie tipici sono presenti in numero sufficiente, mettere l'agglutinazione stimato. Una miscela di sieri sonnei e Flexner, reazione avviene sul vetro.

ulteriori ricerche

Il terzo giorno ci sono cambiamenti che si sono verificati nelle colonie sul mezzo di Russell. Se c'è una cultura che non degrada il lattosio e glucosio fermenta per produrre un acido, viene separata ed analizzata, spendere microscopia, nonché effettuare la semina in "fila strana", ma questa volta espansa. Basta mettere la reazione di agglutinazione, al fine di identificazione sierologica.

L'ultimo giorno, si può concludere sulla base delle variazioni del "numero di Motley" (se non v'è la fermentazione dei carboidrati), così come riassume la reazione di agglutinazione.

Conservazione e preparazione

Preparazione di agar Ploskireva avviene come segue:

  1. 55 g di sostanza secca viene agitata in un litro di acqua distillata.
  2. Bollito per due o tre minuti finché l'agar non è ancora completamente fuso.
  3. Versare in piastre Petri (opzionale sterilità) strato di 5-6 mm.
  4. Le piastre vengono lasciate aperte per mezz'ora a temperatura ambiente (18-25 gradi). Dopo questo tempo il medium è sufficientemente induriscono e asciugare.

Mercoledì Ploskireva fotosensibile ed igroscopico. La polvere deve essere conservato in una confezione sigillata, l'umidità relativa nella camera non deve superare il 60%. La temperatura ottimale per la conservazione di 2 ° C a 25 ° C. Lo stoccaggio deve rispettare queste regole, altrimenti possibili risultati imprecisi.