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Metodi microscopici in Microbiologia

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. metodi di ricerca microscopici sono modi per esplorare una varietà di oggetti con l'uso di attrezzature speciali. Esso permette di considerare la struttura delle sostanze e organismi, la cui entità è oltre i limiti della risoluzione dell'occhio umano. L'articolo fornisce una breve analisi dei metodi microscopici.

Panoramica

используют в своей практике разные специалисты. moderni metodi di esame microscopico utilizzando diversi esperti nella loro pratica. Tra loro ci sono i virologi, citologia, ematologia, la morfologia, e altri. I principali metodi di esame microscopico sono noti da tempo. Il primo è un modo leggero di guardare gli oggetti. Negli ultimi anni, attivamente introdotto nella pratica, e altre tecnologie. . Così, la popolarità di acquisito a contrasto di fase, luminescenti, interferenza, polarizzazione, infrarossa, ultravioletta, metodo stereoscopica della ricerca. Tutti loro si basano su una varietà di proprietà della luce. . Inoltre, ampiamente utilizzato metodi di microscopia elettronica. Questi metodi consentono gli oggetti di visualizzazione tramite un flusso direzionale di particelle cariche. Va notato che questi metodi di studio sono utilizzati non solo nel campo della biologia e della medicina. в промышленности. metodo molto popolare di studio microscopico di metalli e leghe nel settore. Questo permette lo studio per valutare il comportamento dei composti per la produzione di tecnologie per ridurre al minimo la probabilità di frattura e una maggiore resistenza.

modi di luce: caratteristiche

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Tali metodi microscopici per lo studio di microrganismi e altre strutture basate su diversi risoluzione attrezzature. Un fattore importante è la direzione delle caratteristiche del fascio dell'oggetto stesso. Quest'ultimo, in particolare, può essere trasparente o opaco. In accordo con le proprietà dell'oggetto, cambiando le proprietà fisiche del flusso luminoso – la luminosità e colore dovuto l'ampiezza e la lunghezza d'onda, aereo, fase e direzione di propagazione dell'onda. . In caso di utilizzo di queste caratteristiche e costruire diversi metodi microscopici.

specificità

Per studiare le vie di oggetti leggeri, di solito macchiato. Ciò consente di individuare e descrivere queste o altre proprietà. È necessario che il tessuto è stato fissato, in quanto la colorazione rivelare certe strutture esclusivamente nelle cellule uccise. Nel vivere le cellule si separano un colorante sotto forma di vacuoli nel citoplasma. Lei non dipinge sopra la struttura. Ma con gli oggetti dal vivo e può essere studiata utilizzando un microscopio ottico. A tal fine, modo vitale di apprendimento. In questi casi, un condensatore campo scuro. E 'integrato nel microscopio ottico.

Studiare gli oggetti non verniciate

Essa viene effettuata mediante microscopia a contrasto di fase. Questo metodo si basa sulla diffrazione del fascio in conformità con le caratteristiche dell'oggetto. Durante l'esposizione marcata variazione di fase e lunghezza d'onda. Nella lente del microscopio è presente piastra traslucida. Vivere o fisso, ma non oggetti dipinti essendo trasparente, quasi non cambiano colore, e l'ampiezza del fascio che li attraversa, provocando solo uno spostamento di fase dell'onda. Ma in questo caso, dopo aver attraversato l'oggetto, il flusso luminoso viene deviato dalla piastra. Di conseguenza, tra le travi, mancanti attraverso l'oggetto e introdotti in uno sfondo chiaro, la differenza di lunghezza d'onda si verifica. Ad un certo valore del suo effetto visivo verifica – l'oggetto scuro sarà chiaramente visibile su uno sfondo chiaro, o viceversa (in accordo con le caratteristiche di una piastra di fase). Per ottenere tale differenza deve essere almeno di 1/4 di lunghezza d'onda.

metodo Anoptralny

È un tipo di metodo a contrasto di fase. Metodo Anoptralny implica l'uso di una lente con piastre speciali, che cambiano solo il colore e la luminosità della luce ambientale. Questo amplia notevolmente le possibilità di studiare oggetti viventi non colorati. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applicata a contrasto di fase metodo microscopio di ricerca in microbiologia, parassitologia nello studio delle cellule vegetali e animali, protozoi. Nel metodo di ematologia viene utilizzato per calcolare e determinare la differenziazione delle cellule del sangue e del midollo osseo.

tecniche di interferenza

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Questi metodi di ricerca microscopiche generalmente risolvere gli stessi problemi contrasto di fase. Tuttavia, in quest'ultimo caso, gli esperti possono solo osservare i contorni degli oggetti. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. L'interferenza metodi di ricerca microscopici ci permettono di studiare la loro parte, effettuare un elementi di valutazione quantitativa. Ciò è possibile grazie al frazionamento del fascio luminoso. Un flusso passa attraverso l'oggetto particella, e dall'altro – stato. Nel oculare del microscopio si incontrano e interferiscono. La differenza di fase risultante può essere determinata in peso di diverse strutture cellulari. Quando la misurazione sequenziale è con il predeterminato indice di rifrazione può essere impostato spessore tessuti non fissati e oggetto vivente, il contenuto di proteine in esso, la concentrazione di solidi e acqua, ecc. In accordo con gli specialisti di dati ricevuti sono in grado di valutare indirettamente permeabilità della membrana, attività enzimatica, metabolismo cellulare.

polarizzazione

Si effettua mediante Nicol prismi o Polaroid vaporosi. Essi sono posti tra il campione e la sorgente luminosa. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Metodo microscopio polarizzatore di ricerca in microbiologia ci permette di studiare gli oggetti con proprietà non omogenei. Nelle strutture isotropiche la velocità di propagazione della luce è indipendente dal piano selezionato. Nella tasso sistemi anisotropi varia a seconda della luce orientata lungo l'asse trasversale o longitudinale dell'oggetto. Se il valore di indice di rifrazione lungo la struttura sarà maggiore lungo la trasversale, crea una doppia rifrazione positiva. Questo è tipico di molti oggetti biologici che hanno trovato un orientamento molecolare rigida. Sono tutti anisotropico. In questa categoria, in particolare, il miofibrille, neurofibrille, cilia nell'epitelio ciliato, fibre di collagene, e altri.

il valore di polarizzazione

Un confronto tra la natura della radiazione e l'indice di rifrazione anisotropia dell'oggetto permette di stimare la struttura molecolare dell'organizzazione. Metodo di polarizzazione serve come uno dei metodi di analisi istologiche utilizzati in citologia e così via. Non solo oggetti verniciati può essere studiato alla luce. Metodo di polarizzazione permette di esaminare macchia e non fissato – native – preparazioni di sezioni di tessuto.

tecniche fluorescenti

Essi si basano sulle proprietà di alcuni oggetti invia incandescenza nella porzione blu-violetto dello spettro o raggi UV. Molte sostanze come proteine, alcune vitamine, coenzimi, farmaci, dotati di una (en) luminescenza primaria. Altri oggetti cominciano a brillare con l'aggiunta di un fluorocromo – tinture speciali. Questi additivi sono selettivamente diffusa o distribuita nelle strutture cellulari separati o composti chimici. Questa proprietà è stata la base dell'impiego di microscopia a fluorescenza con istochimiche e studi citologici.

Aree di utilizzo

Utilizzando esperti immuno-fluorescenza rilevare antigeni virali e la loro concentrazione regolata sono identificati virus degli anticorpi e antigeni, ormoni, vari prodotti metabolici e così via. A questo proposito, la diagnosi di herpes, la parotite, l'epatite B, l'influenza e altre infezioni utilizzando metodi fluorescenti di ricerca sui materiali. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. metodo immuno-fluorescente microscopica rileva malignità del tumore, determinare aree ischemiche del cuore nelle prime fasi di un attacco di cuore, e così via.

L'uso della luce ultravioletta

Esso si basa sulla capacità di una serie di sostanze in cellule viventi o microrganismi sono fissi, ma incolore trasparente sotto tessuti leggeri visibile assorbono raggi UV di lunghezza d'onda specifica. Ciò è vero in particolare per i composti ad alto peso molecolare. Questi includono proteine, acidi aromatici (methylalanine, triptofano, tirosina, ecc), acidi nucleici e basi puriniche piramidinovye e così via. La microscopia UV consente di specificare la posizione e il numero di questi composti. Nello studio degli esseri viventi i professionisti possono osservare i cambiamenti nei loro processi metabolici.

Inoltre

La microscopia infrarossi viene utilizzata nello studio sono opachi alla luce e raggi ultravioletti attraverso l'assorbimento degli oggetti flusso strutture la cui lunghezza d'onda 750-1200 nm. Per applicare questo metodo non v'è alcuna necessità di pre-esporre i farmaci per il trattamento chimico. In genere, il metodo di IR viene utilizzato in antropologia, zoologia e altre scienze settore. Per quanto riguarda la medicina, questo metodo viene utilizzato principalmente in oftalmologia e Neuromorfologia. Gli oggetti di studio tridimensionale utilizzando un microscopio stereoscopico. progettazione hardware permette di monitorare l'occhio destro e sinistro con un angolo diverso. oggetti opachi sono indagati relativamente basso ingrandimento (120 volte al massimo). metodi stereoscopiche sono utilizzati in microchirurgia, Pathomorphology in medicina legale.

microscopia elettronica

Viene utilizzato per studiare la struttura delle cellule e tessuti nei livelli macromolecolari e subcellulare. La microscopia elettronica ha permesso di fare un salto di qualità nel campo della ricerca. Questo metodo è ampiamente usato in biochimica, oncologia, virologia, morfologia, immunologia, genetica, e altri campi. significativo miglioramento della risoluzione fornita dal dispositivo flusso capacità di elettroni che passano attraverso il campo elettromagnetico di vuoto. Quest'ultimo, a sua volta, crea lenti speciali. Gli elettroni sono in grado di passare attraverso la struttura dell'oggetto o riflessa da loro con deviazioni da diverse angolazioni. Il risultato viene visualizzato sullo schermo fluorescente del dispositivo. Se microscopia a trasmissione vista in pianta ottenuta durante la scansione rispettivamente circondano.

Prerequisiti

Vale la pena notare che prima dell'esame microscopico elettronico passaggio, l'oggetto è sottoposto a formazione specifica. In particolare, l'uso di fissazione fisica o chimica di tessuti e organismi. materiale in sezione biopsia e, in aggiunta, disidratato, è incorporato in resina epossidica, tagliato lame in vetro o diamante su sezioni ultrafini. Poi il loro contrasto e di studio. Il microscopio a scansione esamina la superficie degli oggetti. Per fare questo, hanno spruzzato una sostanza speciale nella camera a vuoto.